Средство "ендоглюкин" за профилактика и лечение на вирусни заболявания на пчелите и стимулиране развитието на пчелните семейства

Употреба: в пчеларството. Същността на изобретението: инструментът съдържа бактериална ендонуклеаза в размер на 100 000 1 000 000 ea. за 1 g декстран. Инструментът има висок превантивен и терапевтичен ефект срещу вирусни заболявания на пчелите, стимулира развитието на пчелни семейства. 3 раздел.

Изобретението се отнася до лекарства за профилактика и лечение на вирусни заболявания на пчелите и е предназначено за използване в големи пчеларски стопанства, в пчелини с малък брой пчелни семейства, в аматьорски пчелини, както и в пчеларски ферми.

През последните десетилетия у нас се създават големи индустриални специализирани пчеларски ферми за увеличаване на събирането на мед и други пчелни продукти, пчеларството, а любителското пчеларство се развива интензивно. Но поради болести по пчелите загубите в отделните ферми достигат 20-80%. Значителна вреда на пчеларството причиняват вирусни заболявания, водещи до масова смърт на пчелите. Вирусните болести на пчелите се причиняват от създаването на големи индустриални пчеларски ферми, интензивното транспортиране и транспортиране на пчелите, но и от широкото разпространение на паразитни болести по пчелите: вароатоза и аскосфероза. Акарът Varroa Jacobsoni е носител на вируси при пчелите. Друго заболяване на пчелите, аскосфероза, е придружено от отслабване на имунната им система, което в крайна форма също води до разпространение на вирусни заболявания.

Бактериалната ендонуклеаза, произведена от бактерията Serratia marcescens, е ензим. На външен вид е бял или леко жълтеникав прах, без мирис, лесно разтворим във вода, неразтворим в органични разтворители, нестабилен в кисела среда (губи активност).

Бактериалната ендонуклеаза има подчертан антивирусен ефект: инхибира развитието на различни РНК и ДНК-съдържащи животински вируси чрез хидролиза на вирусни нуклеинови киселини. Отнася се за ниско токсични съединения, не дразни кожата и лигавиците на очите.

Бактериалната ендонуклеаза е средство, използвано в пчеларството за предотвратяване на вирусна парализа и стимулиране развитието на пчелните семейства. Лекарството се предлага в комплект, предназначен за лечение на 20 пчелни семейства едновременно.

Ефективността на ендонуклеазата в борбата срещу вирусни заболявания на пчелите обаче е недостатъчна поради нестабилността на нейните свойства, особено в разтвори: в разтвор настъпва рязък спад в ендонуклеазната активност за 2 часа.

Невъзможността за дозиране на ендонуклеаза в малки количества, предназначена за лечение на 2, 5, 10 пчелни семейства, създава неудобства при използването й, особено в практиката на любителско пчеларство. Претеглената ендонуклеаза, равна на 5-15 mg (100 000 единици), е предназначена за обработка на 20 пчелни семейства.

Остава остра задачата за разработване на ефективни и стабилни антивирусни средства, които разширяват арсенала от лекарства за превантивно и терапевтично въздействие върху вируси, причиняващи заболявания при пчелите.

Един от начините за решаване на този проблем е средство за предотвратяване на вирусни заболявания на пчелите и стимулиране на развитието на пчелни семейства, съдържащо бактериална ендонуклеаза и декстран при следното съотношение, напр./G: Бактериална ендонуклеаза 100000-1000000 д.а.

Декстран До 1 g Единицата на ендонуклеазна активност е количеството ензим, което причинява увеличаване на оптичната плътност на киселинно разтворимите продукти на РНК хидролизата с 1 p.u. при дължина на вълната 260 nm за 20 минути при 37 o С.

Авторите наричат ​​лекарството ендоглукин.

Агентът има висок профилактичен и терапевтичен ефект срещу вирусни заболявания на пчелите: след лечение с този агент пчелните семейства, засегнати от филаментовирус, колониите са имали средно с 34,8% повече пило в сравнение с контрола. Когато се използва бактериална ендонуклеаза за лечение на пчелни семейства, засегнати от нишкови заболявания, нарастването на пилото е само 5,9% в сравнение с контролата. Продуктът е стабилен в разтвор: не губи активност през деня.

Такъв ефективен профилактичен и терапевтичен ефект на агента не е следствие от влиянието на отделните му компоненти: ендонуклеази и декстрани: Декстрансът е група бактериални полизахариди, състояща се от -D-глюкопиранозни остатъци. Частично хидролизирани декстрани, така наречените клинични декстрани, се използват за приготвяне на плазмени заместители за антишоково и хемодинамично действие.

Не се наблюдава антивирусен ефект на декстраните. Лекарството, съдържащо ендонуклеаза и декстран, има висок профилактичен и терапевтичен ефект и е ефективен стимулатор за развитието на пчелните семейства.

Агентът съгласно изобретението се получава чрез смесване на бактериална ендонуклеаза и декстран в буферен разтвор при разбъркване, докато компонентите се разтворят напълно. Полученият разтвор се дозира във флакони и след това се лиофилизира, след което флаконите се затварят херметически.

П р и м е р 1. Приготвяне на средства с доза за лечение на 1-2 пчелни семейства. Използваният декстран е полиглюцин, известен като кръвен заместител 7.

100 ml дестилирана вода се излива в мерителна чаша с вместимост 0,5 L, добавят се 2 ml 0,1 mol/L буфер с рН 8,0, след това се добавя претеглена порция ендонуклеаза с активност 1,26 0,5 милиона ae. и претеглена порция декстран (полиглюцин) 5 г. Обемът на съдържанието се довежда до 200 ml с дестилирана вода, разбърква се старателно на магнитна бъркалка, докато ендонуклеазата и полиглюцинът се разтворят напълно. Полученият разтвор се дозира във флакони (100 флакона) и се лиофилизира. След това флаконите се затварят с гумени запушалки и се навиват с алуминиеви капачки. Дейността, получена в 1 бутилка, е най-малко 10 000 единици.

Лекарството може да се съхранява 2 години при 4-20 ° C, защитено от светлина. Лекарството се доставя с ендонуклеазен активатор; за това бутилка, съдържаща 0,1 g магнезиев хлорид или 0,1 g магнезиев сулфат, е прикрепена към бутилката с получения агент.

П р и м е р 2. Приготвяне на продукт с доза за лечение на 10 пчелни семейства.

100 ml дестилирана вода се излива в мерителна чаша с вместимост 0,5 l, добавят се 2 ml 0,1 mol/l буфер с pH 8,0, след което се добавя претеглена порция ендонуклеаза с активност 6,3 0,5 ml u. и претеглена порция декстран (полиглюцин) 5 г. Обемът на съдържанието също се довежда до 200 ml с дестилирана вода, разбърква се старателно, например на магнитна бъркалка, до пълното разтваряне на ендонуклеазата и полиглюцина. Разтворът се разпределя във флакони (100 флакона) и се лиофилизира, след което флаконите се затварят с гумени запушалки и се навиват с алуминиеви капачки. Активността на продукта, получен в една бутилка, е най-малко 50 000 единици.

Трябва да се отбележи, че с увеличаване на претеглената част на ендонуклеаза с активност над 6,3 0,5 милиона. и претеглена порция полиглюцин над 5 g, процесът на сушене чрез замразяване на лекарството е труден: на повърхността на разтвора се образува филм, който предотвратява по-нататъшното изсушаване. Това значително удължава времето за сушене.

Всяка бутилка от продукта е придружена от бутилка с ендонуклеазен активатор, съдържаща 0,5 g магнезиев хлорид или 0,3 g магнезиев сулфат.

Агентът се използва под формата на аерозол. Препоръчително е да се приготви разтвор на продукта преди обработката на пчелните семейства. Активността на разтвора не намалява през деня.

За обработка, например, две пчелни семейства, съдържанието на един флакон с активност 10 000 единици. разтворени в 100 ml дестилирана или охладена преварена вода и към този разтвор се добавят 0,1 g магнезиев хлорид или 0,1 g магнезиев сулфат.

За преработка, например, 10 пчелни семейства, съдържанието на една бутилка с активност 50 000 единици. разтваря се в 500 ml дестилирана или охладена преварена вода и към разтвора се добавят 0,5 g магнезиев хлорид или 0,3 g магнезиев сулфат.

Лечението на пчелните семейства за профилактика и лечение на вирусни заболявания, например филаметовироза, както и за стимулиране на развитието на пчелни семейства, се извършва през пролетта или пролетно-летния период при температура на въздуха най-малко 14 ° C 3-5 пъти с интервал от 7-10 дни. Пчелните семейства се третират чрез пръскане на улиците с разтвор на агента рано сутрин или късно вечерта, като се използва фин аерозолен спрей, например от типа "Rosinka" или пръскачка за боя "Shine". Нежелателно е да се използва ендоглюкин през есента, тъй като в същото време броят на пчелните семейства започва рязко да се увеличава, което в условията на есен ограничен подкуп може да доведе до смъртта им поради липса на храна.

Всяка улица се напръсква за 2-3 секунди в доза 4-5 ml. Консумацията на лекарствения разтвор за едно пчелно семейство със сила 10-12 стандартни рамки е 40-50 ml (5000 e.a.).

Експерименти върху стимулиращия и антивирусен ефект на лекарството са проведени в експерименталния пчелин VIEV "Torbeevo" (Таблица 1) и в пчелина на държавната ферма на името на В.И. XXI конгрес в Московска област. (Таблица 2), както и в пчелина с. Морозово, Новосибирска област (Таблица 3). За експерименти върху пчелини в Московска област бяха избрани семейства, в които откриха пчели, заразени с нишкови болести (вирусно заболяване, причинено от нишковиден вирус). Сформирани са три групи, еднакви по състав (като се вземе предвид броят на отпечатаното пило и броят на заетите от пчелите рамки). За разширяване е използвана само основа.

Първата група е лекувана с ендоглюцин в доза 5000 IU. за семейство четири до осем пъти с интервал от 4-9 дни. В същото време втората група е лекувана с бактериална ендонуклеаза в същата доза, третата група е контролната (без лечение).

В експерименталния пчелин Торбеево колониите, третирани с ендоглюцин до края на експеримента, са имали пилки средно с 34,8% повече, отколкото в чистата контрола и са изграждали средно 8,5 пити, докато колониите, третирани с бактериална ендонуклеаза до края на експеримента експериментът е имал пило средно само с 5,9% повече в сравнение с чистия контрол и е изградил средно 5 гребена (в чистия контрол 4 гребена).

На пчелина на държавната ферма. На 21-ия конгрес колониите, третирани с ендоглюцин до края на експеримента, са имали пилки средно с 12,3% повече, отколкото в чистата контрола, и са изграждали средно 11 пити, докато колониите, третирани с бактериална ендонуклеаза, са имали средно само 1,9% отколкото при чист контрол и е изграден средно 9 клетки (същото количество при чист контрол).

Стимулиращият ефект на ендоглюкин върху конвенционално здрави пчелни семейства във връзка с вирусни заболявания е тестван в пчелин в село Морозово, област Новосибирск. Контролната група се третира с вода. След 10 дни бяха проведени общо три лечения. Резултатите от теста са показани в таблица 3.

Медената продуктивност на семействата се взема предвид от търгуемия и брутния мед, като се вземе предвид и меда, събран чрез наслояване от тази група.

По този начин в конвенционално здравите пчелни семейства ендоглюкин стимулира развитието и растежа на семействата по отношение на контрола: броят на рамките с пило от различни възрасти с 23%; броят на отпечатаното пило средно на семейство с 9%; наслояване 5 пъти; брутна продуктивност на мед с 96%. ниско токсично съединение. Неговата LD50, определена при експерименти с мишки с интраперитонеална инжекция, е 250 mg/kg. Проби от мед, получен от пчели, третирани с ендоглюцин, не се различават по изследваните биологични свойства от мед, получен от непокътнати пчели. В експерименти с мишки, плъхове, зайци и морски свинчета не са разкрити токсични, дразнещи кожата, резорбтивни и алергенни свойства на такъв мед.

В процеса на тестване на лекарството в пчелини не са разкрити отрицателни последици от употребата на ендоглюцин.

Агент за профилактика и лечение на вирусни заболявания на пчелите и стимулиране развитието на пчелни семейства, включително бактериална ендонуклеаза, характеризиращ се с това, че допълнително съдържа декстран със следното съотношение на компонентите на бактериалната ендонуклеаза, напр. 100 000 1 000 000 декстран, g До 1

MM4A - Предсрочно прекратяване на патент на СССР или патент на Руската федерация за изобретение поради неплащане на таксата за поддържане на патента в сила своевременно