Съвременни постижения в диагностиката на ХИВ инфекцията Текстът на научната статия по специалността "Медицина и здравеопазване"

Тази статия предоставя информация за съвременния напредък в диагностиката на ХИВ инфекцията, предоставя подробно описание на диагностичните методи, техните плюсове и минуси

Съвременни постижения в диагностиката на ХИВ-инфекция

Тази статия предоставя информация за последните постижения в диагностиката на ХИВ-инфекция, подробно описание на диагностичните методи, техните предимства и недостатъци

Текст на научната работа по темата "Съвременни постижения в диагностиката на ХИВ инфекция"

UDC 616.98 BBK 53/57

СЪВРЕМЕННИ ПОСТИЖЕНИЯ В ДИАГНОСТИКАТА НА ХИВ ИНФЕКЦИЯТА

L.L. NIKULSHINA, FGBOUVO YUGMU, Министерство на здравеопазването на Русия

e-mail: [email protected] D.D. FOMENKOVA, FSBEI HE SUSMU, Министерство на здравеопазването на Русия e-mail: [email protected]

Тази статия предоставя информация за съвременния напредък в диагностиката на ХИВ инфекцията, предоставя подробно описание на диагностичните методи, техните плюсове и минуси.

Ключови думи: ХИВ, СПИН, диагностика.

Уместност. Първото целенасочено запознаване на студентите от SUSMU с ХИВ инфекция започва през втората година на обучение (за студенти от специалността "Обща медицина"), или през третата (за студенти по специалността

"Педиатрия") в Катедрата по микробиология, вирусология, имунология и KLD в рамките на дисциплината "Имунология". Тази тема се изучава от студенти от медицинския и педиатричния факултет, както в практически часове, така и в лекции [8]. Продължителността на практическото обучение за студенти от медицинския факултет е 4 академични часа, детски - 2. Продължителността на лекция и в двата случая е 2 академични часа. За съжаление, поради липса на време, студенти, обучаващи се по специалност „Педиатрия“ изучават този въпрос в рамките на темата „Имунодефицитни състояния“ заедно с първични имунодефицити. По този начин, вече в 2-3 курса, студентите по медицина ще научат подробна информация за съвременните постижения в диагностиката на ХИВ инфекцията, използваните методи за диагностика, техните плюсове и минуси [2, 5].

Изследването за HIV инфекция се извършва, за да се определи безопасността на кръвопреливането и трансплантациите, да се изследва динамиката на HIV инфекцията и да се идентифицират пациенти с последваща поддържаща терапия.

Диагностиката на HIV инфекцията включва определяне на циркулиращи антитела, антигени и имунни комплекси в кръвта,

както и култивирането на вируса, идентифицирането на неговия геном и оценката на функцията на клетъчната връзка на имунната система, тъй като вирусът заразява CD4 клетките, отговорни за клетъчния имунитет. Основната роля принадлежи на методите на серологична диагностика, насочени към определяне на антитела, както и на антигени на патогена в кръвта или други биологични течности на тялото.

Скрининг - предназначен за извършване на първични кръвни тестове за наличие на антитела срещу ХИВ протеини. Извършва се за изследване на популацията за носител на вируса. Недостатъкът на този метод е, че той лесно може да даде като

фалшиво положителни резултати, което не е твърде приятно за нервната система на потенциален пациент и фалшиво отрицателни, „прескачане“

заразени хора. Но този етап е много подходящ за изследване на големи групи от населението: той изисква ниски разходи за труд и бюджетни ресурси.

Потвърждаването на получения скрининг резултат позволява използването на специални методологични техники за изясняване на първичния положителен резултат, получен на предишния етап. Но използваните методи на този и следващия етап са скъпи, поради което се използват само за изследване на положителните резултати от скрининговия метод. Окончателна проверка за наличие и специфичност на маркери за ХИВ инфекция, идентифицирани на предишните етапи на лабораторната диагностика.

Тестове, използвани на практика за идентифициране на заразени с ХИВ:

ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA), реакциите на аглутинация се използват на етапа на скрининг, имунно блотиране (IB), полимеразна верижна реакция (PCR) за потвърждаване или отхвърляне на първоначалния резултат и определяне на количеството антитела (AT) към гръбначните кости на вируса [7].

Ензимният имуноанализ е основният и най-широко използван метод за определяне на антитела срещу ХИВ. Вземете чиния с кладенци, където се въвежда пречистеният антиген (AG) на вируса на човешката имунна недостатъчност, добавете серум

разследван. Всичко това се измива и се въвеждат „антитела срещу антитела“ - имуноглобулини на животински производители срещу човешки антитела, които имат прикрепен към тях ензим - пероксидаза. След това всичко се измива отново и към киселинната среда, произведена от пероксидазата, се добавя цветен индикатор. Ако субектът е имал антитела срещу ХИВ, те се свързват с AG на вируса и не се отмиват. След това антителата към антителата се свързват с тези имунни комплекси и също не се отмиват. Когато се добави индикатор, който реагира на киселинната среда, създадена от пероксидазата, сместа се оцветява. Количеството AT се оценява по интензивността на цвета, който се проверява във фотоколориметъра.

ELISA често дава фалшиво положителни резултати. Това се дължи на недостатъчно пречистване на имуносорбента от баластни протеини; спонтанно свързване на серумни антитела с пластмаса, ако неговите области, които не са заети от имуносорбента, са недостатъчно блокирани или не са блокирани от напълно специален неутрален протеин; кръстосано взаимодействие с HIV протеини на имуносорбента на различни протеини, присъстващи в кръвта на лица с определени, по-често автоимунни патологични процеси като множествена склероза, системен лупус еритематозус, туберкулоза; с чести дарения, инфекциозни и

кръвопреливане, трансплантация на органи и тъкани, както и хора на хемодиализа; с наличие на ревматоиден фактор в кръвта, често

фалшиво положителни реакции [3].

Окончателната диагноза на HIV инфекцията може да бъде установена само след положителен IB резултат. За нейното изпълнение се използва нитроцелулозна лента, върху която се нанасят вирусни протеини. Вземането на кръв за IB се извършва от вена. След това се подлага на специална обработка и съдържащите се в серума му протеини (антитела срещу ХИВ) се отделят в специален гел според техния заряд и молекулно тегло (манипулацията се извършва на специално оборудване под въздействието на електрическо поле). Нитроцелулозна лента се нанася върху гела от кръвен серум и попиването ("попиване") се извършва в специална камера. Лентата се обработва и ако в използваните материали има антитела срещу ХИВ, те се свързват с антигенни ленти на IB и се появяват като линии. При липса на редове - IB е отрицателно [1].

При получаване на положителни резултати от теста на референтния етап на лабораторна диагностика на ХИВ инфекция и отрицателен резултат от изследването по метода IB, задължителна повторна експертна диагностика се извършва 6 месеца след първия преглед. Ако резултатите от IB са отрицателни 12 месеца след изследване на първата проба, или

несигурен, тогава при липса на рискови фактори, клинични симптоми или други фактори, свързани с ХИВ инфекция, субектът се отстранява от диспансерно наблюдение.

72 ° C. Ензимът "строител" се доближава до "семената" и синтезира нова верига на ДНК. С края на синтеза на нова верига на ДНК, завършва и PCR цикълът. Един PCR цикъл, който продължава 203 минути, за генериране на достатъчно количество генетичен материал за

идентификация, обикновено се извършват 30-50 PCR цикъла, което отнема 2-3 часа и ви позволява да получите милиони копия на определена част от вируса.

PCR чувствителността е откриване на вирусни гени в една на всеки пет хиляди клетки. Недостатъците на тази реакция са, че дори и най-модерните методи за нейното създаване и реагенти позволяват да се определи вирусния товар не по-нисък от определено ниво - 50 копия/ml. Също така сложността на настройката за PCR и нейната висока цена, голямо количество време

не позволявайте този метод да се използва при рутинната лабораторна диагностика на ХИВ инфекция за установяване на реакция

Когато диагностицирате ХИВ, е необходимо да знаете периода на "тъмния лабораторен прозорец", когато количеството антитела срещу ХИВ е недостатъчно за

чувствителност на тестовите системи. Този период варира от една седмица до три месеца от момента на заразяване с ХИВ, в зависимост от нивото на чувствителност на тестовата система. Следователно в повечето страни по света е въведена система за използване на кръв само след като се съхранява 3-6 месеца, за да се извърши задължителен повторен преглед за ХИВ инфекция на донори на тези дози кръв и нейните компоненти.

1. ХИВ инфекция и СПИН: Национално ръководство/изд. В.В. Покровски. - Москва: GEOTAR-Media, 2013. - 608 с.

2. Долгушин И.И. ХИВ инфекция: етиология, патогенеза, лабораторна диагностика: учебно помагало за студенти./И.И. Долгушин, О. А. Gizinger, Yu.S. Шишкова и други - Челябинск, 2014. - 77 с.

3. Долгушин И.И. ELISA диагностика в практиката на лекар: учебник. ръководство за студ. пчелен мед. Университети/И.И. Долгушин, Л. Ф. Телешева, А. В. Зурочка и други - Челябинск: Челябинска държавна медицинска академия, 2003. - 68 с.

4. Долгушин И.И. Полимеразна верижна реакция (PCR) и нейното приложение в диагностиката на инфекциозни заболявания: учебник. ръководство за студ./И.И. Долгушин, О. Л. Колесников, Л.Ф. Телешева. - Челябинск, 1999. - 10 с.

5. Девятяров Б.Г. Вторични имунодефицитни състояния. Имунология на ХИВ инфекцията. Синдром на придобита имунна недостатъчност. - Челябинск, 2003. - 63 с.

6. Дмитриев Г.А. Диагностика на полово предавани инфекции/G.A. Дмитриев, И.И. Глазко. -Москва: Бином, 2007. - 320 с.

7. Libman G. ХИВ инфекция: транс. от английски/Г. Либман, Х. Макадон. - Москва: GEOTAR-Media, 2013. - 560 s.

8. Мезенцева Е.А. Мултимедийни презентации като иновативен педагогически метод на работата на катедрата/Е.А. Мезенцева, М.В. Пешикова, А. Ю. Savochkina et al. // Оптимизация на висшето медицинско и фармацевтично образование: управление на качеството и иновации: II научно-практическа. Конф.: Съб. статии. -Челябинск, 2011. - стр. 74-76.

СЪВРЕМЕННИ НАПРЕДИ В ДИАГНОСТИКАТА НА ХИВ-ИНФЕКЦИЯТА *

L.L. NIKULSHINA, SUSMU, Cie1uaYtk, Russio

e-taI: tka-1u @ taIgi D.D. FOMENKOVA, SUSMU, Skelwai ^ k, Russiu e-maI: ean // ka95 @ maIgui

Тази статия предоставя информация за последните постижения в диагностиката на ХИВ-инфекция, подробно описание на диагностичните методи, техните предимства и недостатъци.

Ключови думи: ХИВ, СПИН, diQgnostics.

* Научен ръководител: д-р, старши преподавател Пешикова М.В.