РНК NASBA тест

Често в гинекологичната и венерологична практика човек трябва да се сблъска със ситуация, при която е невъзможно да се диагностицира абсолютно точно гонорейна или хламидиална инфекция при жени въз основа на най-често използваните диагностични методи (микроскопия на цитонамазка, PCR диагностика, изследвания на културата). Това се дължи на особеностите на протичането на тези заболявания при жените (неясна клинична картина, бързо нарастваща инфекция), както и на неправилна първична диагноза и предписване на антибиотици, на които тези микроорганизми са резистентни, и появата на муден, скрит инфекциозен процес. В такива случаи се използва RNA-NASBA тест.

В допълнение, тази техника дава възможност да се оцени ефективността на лечението на тези заболявания, тъй като определянето на РНК на агента е възможно само в ситуация, в която не е настъпило елиминиране на хламидии и гонококи. Диагностиката с помощта на PCR, базирана на идентифициране на ДНК след лечение, не винаги може да бъде показателна, тъй като е много стабилна структура и нейните фрагменти могат да продължат дълго време в човешките епителни клетки, което води до фалшиво положителни резултати от PCR диагностиката . Този факт формира препоръките за провеждане на контролни тестове, не по-рано от 3-4 седмици след завършване на лечението. Тест за РНК NASBA може да се извърши още няколко дни след последната доза антибиотик. Освен това може да се използва за диагностициране на вирусни заболявания.

Характеристики и предимства
Методът RNA-NASBA (Nucleic Acids Seaquencence Amplification) се основава на определянето на микробната РНК молекула. В този случай се използват транскрипционни усилвания с участието на следните ензими: обратна транскриптаза, РНК-аза и РНК-полимераза. Методът NASBA открива жизнеспособни бактериални и вирусни елементи, тъй като синтезът на РНК се осъществява само във жизнеспособни клетки. Друга основна характеристика на този тест е неговата висока чувствителност, т.е. за да се получи резултат, се изисква малко количество от тестовия материал, който може да съдържа единични бактериални клетки или вирусни частици. Този факт позволява с висока ефективност да се откриват латентни, хронични, асимптоматични инфекциозни процеси.

Техника за вземане на проби от материали
Правилата за вземане на материал за теста RNA-NASBA са както следва: остъргване на клетки от цервикалния канал и уретрата се взема от жени. В редки случаи е възможно допълнително да се използва урина.

  • След излагане на шийката на матката, слузът се отстранява от повърхността на шийката на матката със стандартен тампон, след което специална сонда (поставена в цервикалния канал) се остъргва епителните клетки чрез въртеливо движение за 3-4 секунди.
  • Сондата се отстранява, краят се отчупва и се поставя в специална епруветка с транспортна среда. Друга сонда се взема по подобен начин от уретрата.
  • Преди да вземете материала, се препоръчва да се въздържате от уриниране в продължение на 2 часа.
  • Външният отвор на уретрата се третира със стерилен физиологичен разтвор.
  • Също така е възможно да се извърши пръстов масаж на уретрата, за да се получи материал от дълбоките слоеве.
  • Ако се изисква изследване на урина, тогава се използва сутрешната порция, която се подлага на центрофугиране. Утайката от урина, получена след центрофугиране, подлежи на изследване.

По този начин тестът RNA-NASBA е високотехнологичен и силно чувствителен изследователски метод, основан на откриването на РНК молекулата на вируси и бактерии.