ХИМИЧЕН АНАЛИЗ НА ЛИЦЕНТА КАТО ПОТЕНЦИАЛЕН БИОС - Съвременни проблеми на науката и образованието

Съдържанието на биологично активни вещества (BAS) в талама на лишеите определя тяхното доста широко приложение в официалната и народната медицина за лечение на заболявания на стомашно-чревния тракт, дихателните органи, инфекциозни кожни заболявания, ендокринни нарушения и тяхното използване като имуномодулиращо, противотуморно, хепатопротективни и детоксикиращи препарати [8, 9]. Въпреки факта, че лишейните вещества имат широк спектър от лечебни свойства, включително антимикробни, антимикотични, антивирусни, противовъзпалителни, аналгетични, антипиретични, антипролиферативни и цитотоксични, техният терапевтичен потенциал все още е недостатъчно проучен, което възпрепятства широкото производство на фармацевтични продукти, базирани на тях и тяхната употреба в медицината.

Активното вещество на биопрепаратите на базата на лишеи от суровини, разработено и произведено в лабораторията по механохимична биотехнология на Североизточния федерален университет - β-олигозахариди от лишеи, са в състояние да свързват вредни вещества от различно естество (тежки метали (HM) и радионуклиди, карбонилни съединения и феноли, млечна киселина и др.) други органични съединения) и ги отстранете от тялото [1-4, 6,7].

В същото време първото изискване за самата биосуровина - лишеите - е тяхната екологична чистота, тъй като е известно, че местните тали, растящи в райони, замърсени с тежки метали и/или радионуклиди, са в състояние ефективно да сорбират и да ги акумулират [10].

Целта на тази работа е да се анализира съдържанието на токсични (Pb, Hg, Cd, Fe, As), биогенни (I, Se, Ca, Mg, P, K, Na, Li) елементи и радионуклиди (137 Cs и 90 Sr) в тала на лишеи от р. Кладония и определяне на някои биологично активни вещества чрез хроматография.

Материали и методи за изследване

Фиг. 1. Зони за събиране на лишеи в Република Саха (Якутия) •

Съдържанието на цезий и стронциеви радионуклиди се определя с помощта на гама-бета-спектрометричен комплекс USK „Gamma Plus“ със софтуера „Progress“ за тестване на проби от храни за съответствие с изискванията на критериите за радиационна безопасност [5].

Лишейните суровини, събрани в района на Анабар, на 150 км северно от село Сааскилах, бяха анализирани с помощта на метода на атомно-емисионна спектрометрия с индуктивно свързана плазма.

При изследването на биологично активни вещества преди това беше съставен списък на съединенията, които трябва да се определят, за да се оцени съдържанието на физиологично активни компоненти: арбутин, галова киселина, канелена киселина, хлорогенова киселина, кверцетин, рутин, урсолова киселина, байкалин, байкалеин, кемпферол, лутеолин, скутеларин, делфинидин, апигенин, изорамнетин, хиперозид. Сред тези вещества са флавоноиди, органични киселини, полифенолни съединения и др. За всяко от изброените съединения условията на масспектрометрично определяне бяха оптимизирани за тандемния режим на откриване на маса в режим на регистрация на отрицателни йони. Избрани са йонните преходи, декластриращият потенциал и енергията на сблъсъка в камерата за сблъсък. Също така бяха получени спектри на хроматограми в ултравиолетовия диапазон (230 - 400 nm). Използвана е колона с обърната фаза AcclaimRSLC сорбент, дълъг 150 mm, вътрешен диаметър 2,1 mm, размер на зърната на сорбента 3 μm, произведен от Thermo стационарна фаза при анализа на пробите. За хроматографско разделяне се използва програма за градиентно елуиране.

Приготвянето на пробата се състои от приготвяне на три различни екстракта с три разтворителя - метилов алкохол, етилацетат и дихлорометан. Получените екстракти се сушат във вакуумен ротационен изпарител и се разтварят отново в 2 ml метилов алкохол. След това екстрактите се филтрират чрез разреждане 10 пъти с вода.

Освен това летливите компоненти на изследваната проба се определят чрез газова хроматография с масспектрометрично детектиране.

Използва се GCMS-2010 ултра газов хроматографски масспектрометър (Shimadzu, Япония). Разделянето беше извършено на ZB-5 MS колона 30m × 0.25 mm, използвайки режим на градиентно нагряване: 0-2 мин при 40 ° С, 2-28 мин при 40-300 ° С, 28-34 мин при 300 ° С. Сканирането беше извършено в диапазона m/z 15–400 Da. Температура на инжектора –250 ° С, температура на източника на йонизация –250 ° С, температура на интерфейса –250 ° С, напрежение на детектора –400 eV. Инжектирането на проби се извършва в два режима: инжектиране на 0,5 ml нагрята (80 ° С, 10 минути) пара върху проба от растителен прах с добавяне на 1 ml метанол и 1 μl течни екстракти от CH2Cl2, EtOAc, и MeOH от този прах, разреден 100 пъти в СН2С12.

Резултати и дискусия

Получени данни за съдържанието на токсични (Pb, Hg, Cd, Fe, As), биогенни (I, Se, Ca, Mg, P, K, Na, Li) елементи в талите на лишеи от река Кладония в сравнение с MPC за съответните елементи в хранителните продукти са показани на фиг. 2, по отношение на 137 Cs и 90 Sr - на фиг. 3.

Фиг. 2. Съдържанието на токсични (Pb, Hg, Cd, Fe, As), биогенни (I, Se, Ca, Mg, P, K, Na, Li) елементи в проби от тали от лишеи от река Кладония, взети в пет района на Якутия, в сравнение с MPC

Фиг. 3. Съдържание на 137 Cs и 90 Sr в проби от талии лишеи от река Кладония, взети в четири района на Якутия. ГДК за цезий 200 Bq/kg, за стронций - 100 Bq/kg

По време на предварителните експерименти за определяне на биологично активни вещества в пробата бяха открити следните съединения, които са представени в таблица 1.

Химикали, открити в екстракти