Техника на оцветяване на Лий (откриване на миокардно увреждане от различен произход с хематоксилин-базичен

ИНДЕКС НА ДОСТАВКА НА МИОКАРДНА КРЪВ

(Митрофанова Л. Б., Аминева Х. К. Макроскопичен и органометричен анализ на сърцето при патология. Ръководство за лекари. - SPb: GPAb, брой 21, 1998. - 60с.)

Индексът на кръвоснабдяването на миокарда отразява адекватността на кръвоснабдяването на миокарда, разкрива неговия дефицит; показва каква маса на миокарда осигурява 1 mm 2 от площта на съда. За да го изчислите, трябва да определите нетната маса на сърцето (миокарда):

MC - сърдечна маса,

Където EF е масата на епикардната мазнина с големи съдове.

След това се изчислява общата площ на лумена на артериите:

S = L1 2 + L2 2 + L3 2/4π,

Където L е периметърът на коронарната артерия (LOA, LAD, RCA в най-тесните части на проксималната третина).

PCM се определя по формулата:

Например, сърдечно тегло 650g, епикардна мазнина - 50g, периметър LAD 3mm, LOA - 2 mm, PKA - 10 mm.

S = 3 2 +2 2 +10 2/4П = 113/12,56 = 8,99 мм

Този показател е високо информативен показател за миокардна исхемия. Стойностите му от 21,5 до 25 g/mm 2 съответстват на ангина пекторис при кардиомиопатия и миокардит.

25-39g/mm2, наблюдавани при лица с постинфарктна кардиосклероза.

40g/mm2 и повече показва остра исхемична катастрофа - AIO или инфаркт на миокарда.

ПРОБИ С ТЕТРАЗОЛИЕВИ СОЛИ

(Kaktursky L.V. Внезапна сърдечна смърт (клинична морфология). Медицина за всички, 2000. - 127 с.)

Макроскопски тест за исхемия с нитро син тетразолий (нитро-CT реакция), използван директно в секционната маса. Използва се и тестът за калиев телурит. Лента от миокардна тъкан, подозрителна за исхемия, се поставя в чаша на Петри, напълва се с 1-2% разтвор на реагента и се оставя за 30-40 минути в термостат при 37 ° С. Жизнеспособният миокард става тъмно лилав. Исхемичната зона не дава положителна реакция и не съдържа багрило, тъй като е бледо оцветена.

Позоваването на експерименталната работа с животни, техниката с перфузия и времето на поставяне на тъкани в TTS е различно. Тази статия има много цветна картина: http: // www. обикновена. edu/ishr/help/mouseinfarct/

Вижте също дискусията на форума за пътеки. марод. ru: http://narod.yandex.ru/userforum/?owner=pathlinks

Тези изследвания са в състояние да разкрият нарушения на функцията на клетките, тъканите и органите на молекулярно ниво (нарушение на енергията, въглехидратния метаболизъм, активиране на липидната пероксидация), когато нарушенията не могат да бъдат идентифицирани нито макро-, нито микроскопски. Пример за такава диагноза е откриването на нарушения във функционирането на калиево-натриева АТФаза - ензим, който поддържа висока концентрация на калий и ниска концентрация на натрий в клетката. Всяко хипоксично увреждане, например остра миокардна исхемия, води до нарушаване на този механизъм и като следствие до спад в концентрацията на калий и проникване на натрий в клетката. Ако смъртта е настъпила през първите 24 часа след началото на атаката, тогава само биохимичният метод на пламъчната фотометрия ще позволи количествено да определи концентрацията на калий и натрий в миокарда и да направи изводи за възможни исхемични увреждания на миокарда.

Калиев и натриев електролит в миокарда:

Натрий 24-48 μmol/g

Калий 51-75 μmol/g

Диагностична стойност. Намаляването на съотношението калий/натрий под 1,0 показва остри исхемични нарушения в изследваната област на миокарда.

ALT 5-40 U/L AST 5-40 U/L

Коефициент на Де Ритис (AST/ALT) Нормални стойности 1,33 ± 0,42

> 1,33 е признак за смърт на миоцитите (миокарден инфаркт), синдром на катастрофа, интравитални увреждания. Заедно с появата на тропонин-Т в кръвта.

Креатин киназа 40-370 U/l (37 0 С). Растежът на активността започва 4-6 часа след инфаркт, максималната активност след 18-30 часа. След 72 часа активността се нормализира.

LDH 170-520 U/L LDH1 е типичен за MI. Активността корелира с размера на инфаркта на миокарда.

Техника на оцветяване на Лий (откриване на увреждане на миокарда от различен произход с хематоксилин-основен фуксин-пикринова киселина (HOPPA).

Тази техника позволява да се открият ранни исхемични увреждания на миокарда (промени в миокарда в ранните стадии на инфаркт), както и миокардна патология с не-коронарен произход.

Фиксиране на материала в 10% буфериран формалин. Парафинови секции.

Разтвор А. Състав и метод на приготвяне:

n алуминиево-амониев стипца - 6 g

п хематоксилин - 0,5 g

n жълт живачен оксид - 0,25 g

n дестилирана вода 70 мл

Варете разтвора 10 минути, охладете, добавете

- глицерин - 30 мл

- ледена оцетна киселина - 4 мл.

n 0,1% разтвор на основен фуксин в дестилирана вода. Може да се използва многократно (след източване от оцветени секции).

n 0,1% разтвор на пикринова киселина в абсолютен ацетон.

2. Изплакнете с дестилирана вода.

3. Оцветяване с разтвор А, 10 - 30 сек.

4. Изплакнете с течаща вода, 5 минути.

5. Оцветяване с разтвор В, 3 - 6 минути.

6. Изплакнете в дестилирана вода, 5-10 сек.

7. Изплакнете в абсолютен ацетон, 5-10 сек.

8. Диференцирайте в разтвор С, 20 сек. (за животни - 15 сек.).

9. Бързо изплакване в абсолютен ацетон, 5 сек.

10 прочистване на ксилол.

11. Свържете с балсам или полистирол.

Забележка: всички манипулации се извършват при стайна температура. Разтвор С и всички течности, в които се измиват секциите, се сменят след всеки 5 - 6 секции.

Резултат: миокардът с непроменена структура е жълт, участъци от хипоксично увреждане, некротични и некробиотични мускулни влакна (Li fuchsinorrhagia) са червени, съединителната тъкан на белезите е сиво-люлякова, еластичните влакна са яркочервени, гранулите на мастоцитите са черешово червени с различна сянка, еритроцити - ярко червено.

Техника на поляризирана микроскопия за откриване на ранни промени и увреждане на миокарда.

Метод за вземане на материал.

Проби от миокардна тъкан се вземат последователно от повърхността на страничния разрез на лявата камера (от основата до върха на сърцето). В същото време е изпълнено основното условие за изследване на тъкани в поляризирана светлина: надлъжен разрез на мускулни влакна (от апикалната част на стената на лявата камера, от средата на папиларните мускули, предварително дисектирани надлъжно и след това, ако е необходимо, от различни части на сърцето).

Необходими са 2 поляризационни филтъра: поляризаторът се поставя директно под кондензатора, анализаторът се поставя между обектива и окото на изследователя. Задава се осветление, след което се постига потъмняване на зрителното поле. Поставете лекарството. Завъртете сцената, докато се появят ярко светещи структури. Сиянието се появява в момента, когато оста на двойнопречупващия обект е под ъгъл 45 0 спрямо равнината на поляризация.

Вижте работата на Ю.Г. Целарий. Л.В. Семенов. L.M. Непомнящи. Морфологични видове промени в миофибрилите на мускулните клетки на сърцето.

Микроскопска диагностика на ранен миокарден инфаркт.

Нарушенията на енергийния метаболизъм засягат достатъчно бързо състоянието на съкратителния апарат на мускулните клетки на сърцето - миофибрилите, при които настъпват стереотипни промени с различна тежест:

Договорни лезии, отразяващи патологична тотална или фокална контракция на миофибрилите;

Вътреклетъчна миоцитолиза, характеризираща се с фокален лизис на миофибрили;

Бучливо разпадане на миофибрилите в резултат на едновременно мозаечно свиване на групи от саркомери и лизис на неконтроктирани зони на миофибрили.

Характерът на промените в миофибрилите определя тинкториалните свойства на саркоплазмата на увредените кардиомиоцити.