Инактивирани ваксини срещу салмонелоза на птици

Д. Смирнов, кандидат на ветеринарните науки, главен ветеринарен лекар на ППЗ ДГК "Смена"

Т. Рождественская, кандидат на ветеринарните науки, директор на науката,

Е. Кононенко, началник отдел по диагностика, АЕЦ "Авивак"

Е. Светоч, доктор на ветеринарните науки, професор, ръководител на катедрата по молекулярна микробиология,

Държавен изследователски център за приложна микробиология и биотехнологии

Резюме: Авторът е направил експеримент, сравняващ ефективността на чуждестранни и местни

ваксини срещу салмонелоза на птици. Експериментът показа, че и двете лекарства осигуряват трайно епизоотично благосъстояние за тази инфекция.

Птичия салмонелоза е остро или хронично инфекциозно заболяване, което може да бъде причинено от едно или повечеми от рода Salmonella. През последните години обхватът на серовариантите за салмонела, циркумира в тялото на птиците. Заедно с увеличаването на дела на Salmonella enteritidis,Произвеждат се Salmonella gallinarum-pullorum и S. infantis. Според Л. А. Кафтирева. (Санкт Петербург NIIEM, наречен на Пастьор), до 7 серовара на салмонела са изолирани от месо, яйца и техните измивания. Доминиращ javОткрива се Salmonella enteritidis, която достига до 81,3% в пилешкото месо и 88,3% в яйцата.

Проблеми с проявата на салмонелна инфекциятези причини са свързани с две причини: птицата може да се разболее в лека форма без видими клинични признаци или е носител на салмонела завреме, тоест резервоарът на патогена. Croаз пилета, носителят на заразата също е водолюбиви птицидомашни птици (гъски, патици), гълъби, както и гризачи (мишки и плъхове), насекоми (хлебарки), домашни животни и хора (Аронов В.М., 1 999). Всичко това създава постоянен епизоотичен проблем в околната среда, свързан с висок риск от замърсяване със салмо.нелами промишлени домашни птици.

При индустриалното отглеждане на домашни птици antibacteRealal терапия срещу салмонелоза се провежда в стада, където се откриват индивиди, които реагират положително на инфекцията, но не се регистрира клиестествени признаци на заболяването.

Въпреки това, според много изследователи и КомиТете на експертите на СЗО по салмонелоза EFSA (Европейска агенция за безопасност на храните), проблемът не може да бъде разрешен само с използването на антибиотици и химиотерапия. Постоянното им използване води до появата на многоустойчиви раси от микроорганизми (Kolasa A. et al., 2007). Заразнопродуктите от домашни птици се превръщат в източник на гени за устойчивост на много лекарства за опасни за хората патогени. Поради тази причина в САЩ и много европейски страни употребата на антибиотицикърлежите в птицевъдството са строго регламентирани. В компютъраlex на събитията, активно се препоръчват методи за специфична превенция.

В домашната птицевъдна индустрия, за предотвратяване на тази инфекция на птици през последните години, все повече и повечеизползвайте инактивирана ваксина и салмофаги. На примера на ферма за месо, откъде доотрицателен ефект за дълго времене се използва инактивирана ваксина срещу салмонелоза на птици от чуждестранно производство, сравнителни тестове за ефективността на внесената ваксина и местния "AVIVAC-Salmovac".

В две птицеферми 1400 са имунизирани.петна на възраст от 90 дни, в една къща - вносваксина, във втората - местната "AVIVAC-Salmovac". По време на периода на отглеждане птиците от двете групи са били клинично здрави и по време на бактериозалогическа изследователска култура S. enteritidis не тисподелени. Клинично здрави пилета са получени от инкубационните яйца, от които са образувани две групиny 2-, 5-, 10-, 14-, 17- и 20-дневна, по 72 индивида във всяка. Пилетата бяха разделени на случаен принцип в шест подгрупи, по 12 индивида всяка (1-6 и 7-12). Пилета от всяка подгрупа сдържани в отделна клетка. Преди инфекция, двама убиватпилета от всяка подгрупа бяха взети проби от фурнатанито далак и черва, които са изследвани за наличие на салмонела.

За заразяване с опитен (имунен) и контролПри неимунни бройлери е използван щам S. enteritidis 92 Rif/R, устойчив на рифампицин (MIC> 200 μg/ml), вирулентен за бели мишки (LD 50 = 500 CFU) и способен да колонизира червата.прякор, черен дроб и далак на бройлери на всяка възраст. Щамът е получен и поддържан в музея на Федералния държавен университет за наука и технологии PMB.

Предварително се приготвя суспензия от щама, като се използваизползвайки за това стандарта за мътност (10 единици, производствоdstvo SNKI ги. Тарасевич, Москва). Крайната концентрация на живи клетки (CFU), инжектирани в птицата, се определя чрез засяване на суспензия от салмонела върху салсреда с последващо преброяване на пораснали колонии от S. enteritidis 92 Rif/R.

Пилетата са заразени през устата, инжектирайки всеки индивид с предварително определени дози щам S. enteritidis 92 Rif/R: за 1-2-дневни, 1-2 милиарда CFU/птица. и 5-30 дни - от 3 до 5 милиарда CFU/глава.

Като контрола взехме 30 пилета на същата възраст от ферма, където не се извършва имунизация.дажба на стада за разплод срещу салмонелоза. БройлКанавката беше разделена на 6 подгрупи, по 5 животни във всяка, и бяха държани в отделен изолатор по време на експеримента. Пилета от експериментални и контролни групи, заразени с щама S. enteritidis 92 Rif/R, са наблюдавани в продължение на 14 дни. В края на периода на наблюдение черният дроб, далакът и илеумът на мъртвите пилета, както и тези, които са оцелели и са били убити, са изследвани за наличие на S. enteritidis 92 Rif/R.

Да се изследват антиинвазивните свойства на ваксините от neнякои от мъртвите или убити птици изрязват парчета с тегло около 1 g със стерилни ножици, далакът е отстраненrali напълно и отрязва илеумасок с дължина 1,5-2,0 см (с тегло около 1 г) и го отвори по дължината. Претеглените части от черния дроб, далака и червата се смачкват с ножици и се поставят в стерилни контейнери.етикети и претеглени. Добавете към епруветките с пробитеили 4,5 ml стерилен изотоничен хлорен разтвори натрий и хомогенизира съдържанието с пипета. Така приготвената суспензия на органи се титрува по метода на десетократни разреждания - до 10

пет. Суспензия от разреждания 10 °, 1 O "3 и 10

5 менгеметаизсипете в обем от 0,1 ml върху чаши селективен фуражсреда - Ендо агар - с добавяне на рифампицин в концентрация 100 μg/ml за откриване на щам S. enteritidis 92 Rif/R.

Културите се отглеждат в продължение на 24 и 48 часа със скоросттемпература B7 ° C в термостат. След 24 часа инкубация се записват предварителни резултатиtov, а след 48 часа - финалът, броейки акоброят на отглежданите колонии на S. enteritidis 92 Rif/R. След това се определя замърсяването на вътрешните органи на пилетата в CFU на 1 g от претегления орган (CFU/g).

В случай, че при инокулациите върху среда Endo с рифампицин не са регистрирани колонии, характерни за салмонела, пробите се инокулират в неселективна и селективна обогатителна среда.

В присъствието на поне една колония, типична за S. enteritidis 92 Rif/R, беше проведено допълнително проучване. За да потвърдите собствеността, виеразделени култури на род Salmonella и серовариант

Enteritidis използва биохимична тестова система за идентифициране на Enterobacteriaceae ENTEROtest 24 (Lachema, Чехия) и специфични аглутиниращи салмонелни серуми (Санкт Петербургски институт за ваксини и серуми).

Специфичен за салмонела растеж на среда Endo, мустациустойчивостта на културата към рифампицин, биохимичните и серологичните свойства позволиха категорично да се прецени принадлежността на изолираната култура към щама S. enteritidis 92 Rif/R.

Средният бактериален титър (Т), относителната му грешка (8) в органите на пилета, заразени с щама S. enteritidis 92 Rif/R, са изчислени по конвенционални методи.Тодами (Лакин Г.Ф., 1990).

Ефективността на приложените ваксинални препаратиtov се оценяват от относителния титър, който се определя по формулата:

T cf - среден титър на S. enteritidis 92 Rif/R при инфекциявкоренени органи на пилета от експериментални групи;

Tcro - съответстващ среден титър в контрола.

Всички изчисления са извършени с помощта на Microsoft Excel 2007.

Изследванията на проби от черен дроб, далак и черва от пилета от експериментални и контролни групи преди тяхното заразяване със S. enteritidis 92 Rif/Rразкри наличието на бактерии от рода Salmonella spp.

Резултатите от определянето на антиинвазивните свойства на ваксините са представени на фигури 1-3.

Установено е, че при пилета, получени от стадо, ваксинирано с чужда ваксина слединфекция от патогенния щам S. enteritidis 92 Rif/R в

? 16 дни, черният дроб и далакът не са били вътре

са пълни с бактерии от рода Salmonella spp., ино едно на всеки 10 пилета има чревна инфекция. Когато заразени 10- и 14-дневни пилета бяха инфивсички органи са излекувани при 20-40% от индивидите, а на възраст от 7 до 20 дни този показател се е увеличил до 70-100цента.

В групата пилета, чиито родители са имунизирани с инактивирана ваксина "AVIVAC-Salmovac", при заразяване на възраст от 2 и 6 дни, бактерииот рода Salmonella spp. черен дроб 1 проба и червапрякор в 2 и 3 проби от 10. В проби от далак в тези периодиki изследва бактериите не са изолирани. В по-късноне са открити разлики в инфекцията на вътрешните органи и на двете групи.

При контролните пилета, на първия етап от инфекцията (възраст 2 дни), е разкрита 100% инфекция с бактерии от рода Salmonella spp. черен дроб и кишийката на матката, както и далака при 90% от индивидите, но при повечев по-късна възраст при заразени пилета, регистрирайте се100% степен на инфекция във всички проучванияорганите ми.

Таблица 1 показва резултатите от определянето на средния титър на бактериите (CFU) и неговата средна грешка (%), изолирани от вътрешните органи на пилета, полот ваксинирани стада за разплод, когатоинфекция в различни възрастови периоди (2, b, 10, 14, 17 и 20 дни) от патогенния щам S. enteritidis 92 Rif/R.

Показано е, че най-високият инфекциозен титър на щама S. enteritidis 92 Rif/R е установен в черния дроб по време на инфекция на пилета от контролната група на възраст 6 дни - 5.8x1 O 6, титърът на патогена в далак ив червата е съответно 2,8x10 b и 1,5x10 b CFU/gнаистина ли. В сравнение с тези данни при пилетата, roчиито родители са били ваксинирани с ваксината AVIVAC-Salmovac, бактериалният титър в черния дроб по време на инфекция на 2-дневна възраст е 100 пъти по-нисък и към края на експеримента50 пъти.

За допълнително сравнение на ефективността на приложените ваксинални препарати срещу пилешка салмонелоза,канавка от S. enteritidis 92 Rif/R бактерии в заразени пилешки органи (черен дроб, далак и черва), полот родителски стада, ваксинирани с ваксини "AVIVAC-Salmovac" и чуждестранно производство, за контрол на проби (Таблица 2).

Както се вижда от данните в таблица 2, с изключение наиндикатор за чернодробна и чревна инфекция вотглеждани 2-дневни пилета, получени от ражданетолеи, ваксинирани с инактивирана ваксина "AVIVAC-Salmovac" по време на други инфекции във всички проучванияне е установена значителна разлика в сравнение с ваксината от чуждо производство.

Констатации. В резултат на сравнителни опити на ваксини срещу птици S. interitidis,известно е, че домашната ваксина "AVIVAC-Salmovac" по своите антиинвазивни и защитни свойства не го правитъп към внесения аналог и осигури стабилно епизоотично благосъстояние за тази инфекция.

Ваксиниране на кокошки от родителски стада чуждестранни вакуумиcina и "AVIVAC-Salmovak" е ефективен и формира напрегнат имунитет, който надсе дава на пилета трансовариално и ги предпазва в ранна възраст (до 6 дни) по време на инфекция с патогенен щам S. enteritidis 92 Rif/R.

С възрастта нивото на защита на пилетата, полот ваксинирани родители, значително намалява след инфекция със S. enteritidis 92 Rif/R при употребаи двете ваксини.