Прочетете Хистология

  • ЖАНР
  • АВТОРИ
  • КНИГИ 563 765
  • СЕРИЯ
  • ПОТРЕБИТЕЛИ 510 019

Методът на диференциално центрофугиране е изследване на отделни органели или дори техните фрагменти, изолирани от клетката. За това парче от изследвания орган се втрива, пълни с физиологичен разтвор и след това се диспергира в центрофуга с различни скорости (от 2 до 150 хиляди в минута). В резултат на центрофугирането се получават интересуващите фракции, които след това се изследват по различни методи.

Морфометричните методи са количествени методи. Те правят възможно определянето на размера и обема на ядрото - кариометрия, клетките - цитометрия, органелите - електронна морфометрия, както и определянето на броя на клетките от различни популации и субпопулации. Тези методи се използват широко в научните изследвания.

Различни експериментални методи - зареждане с храна и вода, физически методи (UHF, микровълнова печка, лазери, магнити). Те се използват за изследване на реакцията на структури от интерес за определен ефект и се комбинират с методите на морфометрията, цито- и хистохимията. Тези методи се използват и при научни изследвания.

По този начин микроскопията е основният и най-разпространен метод за изследване в хистологията. Приготвянето на хистологичен образец включва следните стъпки.

един. Вземане на материал - парче тъкан или орган. Когато вземате материал, трябва да се спазват следните правила:

1) вземането на проби от материал трябва да се извърши възможно най-рано след смъртта или клането на животното, по възможност от жив обект, за да се запази възможно най-добре структурата на изследваните клетки;

2) вземането на проби от материал трябва да се извършва с остър инструмент, за да не се нарани тъканта;

3) дебелината на парчето не трябва да надвишава 5 mm, така че фиксиращият разтвор да може да проникне през цялата дълбочина на тъканта;

4) наложително е да се маркира парчето, като се посочи името на органа, номера на животното или фамилията на лицето, датата на събиране.

2. Фиксиране на материала. Този етап се провежда, за да спре метаболитните процеси в клетката и да я предпази от разпадане. За това парче тъкан, взето за изследване, се потапя във фиксиращ разтвор. Решението може да бъде просто (алкохол или формалин) и сложно (разтвор на Carnois, фиксатор на Zinker). Фиксаторът причинява денатурация на протеини и поддържа структурата на клетките в състояние, близко до живота. Фиксирането може да се извърши и чрез замразяване - охлаждане с течен азот или струя въглероден диоксид.

3. Изливане на парчета плат в уплътняваща среда (парафин, смола) - или замразяване. Този етап е необходим, за да се направи впоследствие тънък участък от изследваната тъкан.

4. Приготвяне на филийки върху микротом или ултрамикротом с помощта на специални ножове. След това секциите за светлинна микроскопия се залепват върху стъклени стъкла, а за електронна микроскопия се монтират върху специални мрежи.

пет. Оцветяване на секции или тяхното контрастиране (за електронна микроскопия). Преди да оцветите секциите, е необходимо да премахнете уплътняващата среда - девакс. С помощта на оцветяване се постига контрастът на изследваните структури. Оцветителите могат да бъдат класифицирани като основни, киселинни и неутрални. Най-широко използвани са основни багрила (хематоксилин) и киселинни (еозин). Често се използват сложни багрила.

6. Изясняване на участъци в ксилен и толуен. Те са затворени в смоли (балсам и полистирол) и покрити с капак.

След тези процедури лекарството може да бъде изследвано под светлинен микроскоп. Резените, поставени под стъкло за светлинен микроскоп, могат да се съхраняват дълго време и да се използват повторно. За електронна микроскопия всеки раздел се използва само 1 път, докато се снима и изследването на тъканните структури се извършва с помощта на електронен дифракционен модел.

Ако тъканта има течна консистенция (например кръв, костен мозък), тогава препаратът се прави под формата на намазка върху стъклен предмет, който след това също се фиксира, оцветява и изследва.

От чупливи паренхимни органи се правят препарати под формата на отпечатък на орган, извършва се фрактура на този орган, след което се поставя стъклен предмет на мястото на счупването, върху който се залепват свободни клетки. След това лекарството се фиксира и проучва.

От някои органи (например, мезентерия, пиа матер) или от разхлабена влакнеста съединителна тъкан се правят филмови препарати чрез разтягане или смачкване между две чаши, последвано от фиксиране и изливане в смоли.

Тема 3. ВЪВЕДЕНИЕ В КУРСА НА ИСТОЛОГИЯ

Хистология - науката за строежа, развитието и жизнената дейност на тъканите на живите организми. Следователно хистологията изучава едно от нивата на организация на живата материя - тъкан.

Има следните нива на организация на живата материя:

3) структурни и функционални единици на органа;

7) население и други нива.

Хистологията се разглежда като дисциплина, която включва четири основни раздела:

1) цитология, която изучава структурата на клетката;

2) ембриология, която изучава образуването на клетки и тъкани по време на вътрематочно развитие;

3) обща хистология - изучава структурата, функционалните, клетъчните елементи на различни тъкани;

4) частна (или макроскопска) хистология, изучаваща структурите на определени органи и техните системи.

По този начин в хистологията има няколко раздела, които изучават определени нива на организация на живата материя, започвайки с клетъчната и завършвайки с органа и системните компоненти на организма.

Хистологията принадлежи към морфологичните науки. За разлика от анатомията, която изучава структурата на органите на макроскопско ниво, хистологията изучава структурата на органите и тъканите на микроскопско и електронно микроскопско ниво. В този случай подходът към изучаването на различни елементи се прави, като се вземе предвид функцията, която те изпълняват. Този метод за изучаване на структурите на живата материя се нарича хистофизиологичен, а хистологията често се нарича хистофизиология. При изучаване на жива материя на клетъчно, тъканно и органно ниво се вземат предвид не само формата, размерът и разположението на структурите, които представляват интерес, но химичният състав на веществата, които образуват тези структури, се определя от методите на цито- и хистохимията . Изследваните структури също се разглеждат, като се вземе предвид развитието им както в пренаталния период, така и по време на първоначалната онтогенеза. Именно с това възниква необходимостта от включване на ембриология в хистологията на.

Основният обект на хистологията в системата на медицинското образование е тялото на здрав човек и затова тази академична дисциплина се нарича човешка хистология.

Основната задача на хистологията като академичен предмет е представянето на знания за микроскопичната и ултрамикроскопичната (електронно-микроскопска) структура на клетките, тъканите на органите и системите на здравия човек, неразривно свързани с тяхното развитие и изпълняваните функции. Това е необходимо за по-нататъшно изучаване на човешката физиология, патологична анатомия, патологична физиология и фармакология. Познаването на тези дисциплини формира клиничното мислене.

Задачата на хистологията като наука е да изясни закономерностите на структурата на различни тъкани и органи, за да разбере физиологичните процеси, протичащи в тях и възможността за контролиране на тези процеси.

Тема 4. МОРФОЛОГИЯ И ФУНКЦИИ НА ЦИТОПЛАЗМАТА И ОРГАНЕЛА НА КЛЕТКАТА

Цитология - науката за строежа, развитието и живота на клетките. Следователно цитологията изучава моделите на структурна и функционална организация на първото (клетъчно) ниво на организация на живата материя. Клетката е най-малката единица жива материя, която има независима жизнена дейност и способност да се размножава. Клетъчните образувания (ядро, митохондрии и други органели), въпреки че са живи структури, нямат независима жизнена дейност.

Клетка - това е ограничена активна мембрана, подредена, структурирана система от биополимери, които образуват ядрото и цитоплазмата, участвайки в един набор от метаболитни и енергийни процеси, които поддържат и възпроизвеждат цялата система като цяло.