Нюкасълска птича ваксина и начин на приложение

Изобретението се отнася до ветеринарната вирусология, по-специално до ваксина срещу нюкасълска болест и метод за нейното използване.

Известна ваксина срещу нюкасълска болест, направена на базата на щама Парамиковирус а-1 "Bop-74 VGNKI" [1] Най-близката по състав до предложената ваксина е ваксина срещу нюкасълска болест на птиците, съдържаща екстрамебрионална течност от щама на La Sota вирус на нюкасълска болест и защитна среда от обезмаслено мляко или пептон [2] Известен е метод за профилактика на нюкасълска болест на птиците, който се състои в интраназално, екстраембрионално или аерозолно приложение на ваксина срещу нюкасълска болест на птици от Щам La Sota [3] ПРИМЕР R 1. За получаване на ваксина, тъй като вирусът на семената на болестта Нюкасъл използва щам La Sota, който се използва за заразяване на добре развити 9-10-дневни ембриони. Ембрионите се инкубират в продължение на 96-120 часа при 37-38 o C и относителна влажност 60-70%. Едновременно с това се извършва полагане на незаразени ембриони от същата партида, за да се контролира наличието на хемодсорбиращи вируси. Проверката на заразените ембриони се извършва веднъж дневно. Всички ембриони, които умират в рамките на 96 часа, се изхвърлят. За производството на серия от ваксини се използват само живи ембриони, предварително охладени при 4 ° C за най-малко 16 часа.

Пептиди с високо молекулно тегло (30000-80000g) 10-15 Пептиди със средно молекулно тегло (5000-20000g) 68-70 Пептиди с ниско молекулно тегло (5000g) Останалото Приготвяне на стабилизатора: 50 g пептон се смесва с 50 g лактоза с 12,775 g двуосновен натриев фосфат и 3,32 g Trilon B Получената ваксина се опакова в ампули от 2 ml и лиофилизирана.

Преди употреба ваксината се възстановява до първоначалния си обем с редуциращ агент, съдържащ следните вещества, g: Пептон 5 Трилон В 0,23 Натрий дизаменен 9,6 Калий монозаместен 1,74 Твин-80 0,03-0,05 След това се определя броят на дозите във флакона. Една доза за назално инокулиране съдържа 5 10 6 EID50.

По този начин получената ваксина има следния състав: Пептон 50-55 g Лактоза 45-55 g двуосновен натриев фосфат 22.37-27 g
Едноосновен калиев фосфат 1,74-2,0 g Trilon B 2,65-5,00 g Tween-80 0,3-0,5 g
Съдържащи вирус ma-
материал за вирус на болестта
Нюкасълски щам La Sota
с титър хемаглутинир-
активност не по-малко
2048-4096 HAU/ml, съдържание-
яде протеин не по-високо от 3-5
mg/cm и инфекциозни
активност 8.1-11, lgEDI50/ml 100-500 ml Вода До 1 l
Въвеждането се извършва интраназално, орално и аерозолно. Получената ваксина е стабилна при съхранение (виж таблицата).

За да се тества безопасността, ваксината се прилага на 10 пилета в 10 дози интраназално. Периодът на наблюдение за пилетата е 14 дни. Всичките 10 пилета останаха живи в продължение на 14 дни.

П р и м е р 2. Прилагане на ваксината. Преди ваксинацията титърът на майчините антитела в RTGA се определя при 10% от пилетата. Титърът на майчините антитела не трябва да надвишава lg2 2 (1: 4).

Пилетата са разделени на три групи по 10 глави всяка. 3 групи пилета се отглеждат отделно (контролна неваксинирана група).

Пилета от първата група се инжектират назално с една доза от ваксината, пилета от втората група се инжектират назално с 1/10 доза от ваксината. Периодът на наблюдение за ваксинирани птици е 14 дни. 14 дни след ваксинацията се вземат кръвни проби от ваксинирани и неваксинирани птици.

Серумите на всички пилета, ваксинирани с 1 доза интраназално, имат титър на антихемаглутинин най-малко lg2 4 (1:16).

Серумите на всички пилета, ваксинирани с 1/10 доза интраназално, имат титър на антихемаглутинин от най-малко lg2 3 (1: 8).

Серумите на неваксинирани пилета са отрицателни или имат титър на антихемаглутинин не по-висок от lg2 2 (1: 4).

Контролирайте инфекцията на ваксинирани пилета с вирулентен вирус на нюкасълска болест щам "Т". Пилета, предварително ваксинирани интраназално (втора и трета група) и контролната неваксинирана група се инокулират интрамускулно с щама "Т" в доза 10 000 LD 50/0,2 cm 3. Периодът на наблюдение на заразените пилета е 10 дни. Пилета, ваксинирани интраназално с 1 доза, оцеляват; от 10 пилета, ваксинирани интраназално 1/10 от дозата, две са умрели, всички контролни пилета са умрели.

Когато ваксината се прилага чрез пиене, пилетата се разделят на три групи. Пиенето се извършва два дни подред сутрин преди хранене. Пилетата от първата група се инжектират с една доза (5 10 6 EID50), разтворена в 10 ml. Пилетата от втората група се инжектират с 1/10 доза, разтворена в 10 ml. Третата група е контролът. След 14 дни се определя нивото на антителата. При пилетата от втората група тя не е по-ниска от 1:16. Контролната инфекция се извършва с вирулентния щам "Т" на вируса на Нюкасълската болест в доза 10 000 LD50/0,2 cm 3. От втората група падна 1 пиле. Всички пилета от контролната група умряха.

За аерозолна ваксинация пилетата се разделят на 2 групи от 15 глави. В първата група се извършва аерозолна ваксинация с доза 600 EID50. Втората група е контролът. След 2 седмици се определя титърът на анти HA в кръвния серум на пилетата. Средният титър е 1: (64-128). След предизвикателството всички пилета, ваксинирани с аерозол, оцеляха, контролните умряха.