Глава 4. Клинични и лабораторни изследвания

Подготовка на цитонамазка

За приготвянето на цветни препарати се избират отделни бучки и частици храчки и се прехвърлят с калцинирана и охладена шпатула или пинсета върху предметно стъкло, което е покрито с друго предметно стъкло. След това чашите се изтласкват чрез плъзгане, отново се слагат една върху друга и отново се изтласкват; това се прави, докато храчките равномерно покрият и двете стъкла с тънък слой. Ако бучките са много плътни, те се разделят с предварително калцинирани и охладени дисекционни игли. Приготвянето на лекарства изисква определени умения: не можете да приемате твърде много храчки, за да не получите плътна мазка, в която е трудно и понякога невъзможно да се открият бактерии; освен това трябва да се уверите, че храчката е добре и равномерно намазана върху стъклото.

Фиксиране на лекарството. Препаратът трябва да изсъхне напълно на въздух, в противен случай протеинът на храчките ще се коагулира по време на по-нататъшната обработка. Сухи намазки се фиксират върху пламъка на горелката, като бързо преминават стъклените парчета 3-4 пъти през огъня; докато слоят храчки трябва да е обърнат нагоре. Необходимо е да се фиксира много внимателно: ако фиксирането е недостатъчно, тогава при оцветяване храчките ще се измият и ако се преекспонират в огън, храчките се овъгляват и лекарството ще бъде развалено.

За да се намерят различни бактерии в храчките, фиксираният препарат се оцветява с различни бои.

Изследване на храчки за Mycobacterium tuberculosis

Оцветяване. Най-простият и често срещан начин за оцветяване на микобактерията туберкулоза е методът на Ziehl-Nielsen. Лента филтърна хартия, малко по-малка от стъклото, се поставя върху предметното стъкло с подготвения и фиксиран препарат за храчки. Толкова много боя Tsilya (карболов разтвор на фуксин) се излива върху хартията, за да не прелее през ръба на стъклото. След това стъклото се загрява отдолу върху горелката, докато се образуват пари (но не до кипене!), След което филтърната хартия се отстранява с пинсета, излишната боя се измива с дестилирана вода и препаратът се поставя в 3 °/v разтвор на солен алкохол, в който се съхранява до обезцветяване. След това препаратът се измива с дестилирана вода и допълнително се оцветява с разтвор на метиленово синьо за 1/2-1 минута. След това останалата част от боята се измива с дестилирана вода и препаратът се изсушава.

Под микроскоп се появяват червени микобактерии на син фон, който прилича на тънка къса пръчка.