Хартиена хроматография

Разпределителна хроматография. Хартиена хроматография. Седиментна хроматография. Ositovoy (изключване на размера) хроматография. Гелна хроматография.

Разпределителна хроматография.

хроматографски метод, при който неподвижната (неподвижна) фаза е химически свързана с повърхността на неподвижния носител. Подвижната фаза е течност, която служи като разтворител или газ (газова хроматография). Разделянето се дължи на разликата в полярността на отделяните вещества. При разделната хроматография носителят се импрегнира с един от разтворителите ("неподвижен разтворител"), а другият разтворител ("подвижен") се прекарва през опорната колона. Най-често за неподвижен разтворител се приемат вода или други полярни течности (сярна киселина, метилов алкохол и др.); като подвижен разтворител - по-малко полярни течности, които не се смесват с първите във всички пропорции. Част от тестовата смес от вещества, разтворена в подвижен разтворител, се въвежда в колоната и след като разтворът се абсорбира от горната част на колоната, колоната се измива с чист подвижен разтворител. В процеса на измиване има непрекъснато преразпределение на веществата от сместа между двете несмесващи се течни фази. Тъй като различните компоненти на сместа имат различни коефициенти на разпределение, скоростта на движение на отделните компоненти е различна. Компонентът на сместа с най-висок коефициент на разпределение ще има най-висока скорост на движение: C

тези. съотношението на концентрацията на разтворено вещество в подвижната фаза към неговата концентрация в неподвижна фаза.

Едно от основните условия за получаване на ясно разделяне на смес чрез разделна хроматография е практическото отсъствие на каквото и да е взаимодействие на компонентите на сместа с носителя. Ако това условие е изпълнено, тогава, когато колоната се измие, сместа се отделя напълно. Броят на носителите, подходящи за разделна хроматография, е изключително ограничен. Повече или по-малко задоволителни качества притежават такива носители като специално приготвен силикагел, пречистено нишесте, целулоза.

Хартиена хроматография.

взима се лента филтърна хартия с дължина 30-50 см и ширина 1,5 см. Капка смес от аналити се нанася върху единия край на тази лента на известно разстояние от ръба. След това този край на хартията се потапя в тава, съдържаща органичен разтворител, наситен с вода. С бавното движение на разтворителя през порите на хартията, има непрекъснато преразпределение на веществата в сместа между двете течни фази. Ако различните компоненти на сместа имат различни коефициенти на разпределение, тогава скоростта на напредване на отделните компоненти на сместа ще бъде различна. Движението на подвижния разтворител върху хартията може да бъде или низходящо, или възходящо. След завършване на хроматографията лентата хартия се изсушава и след това се развива с реагент, който реагира на цвета с аналита. Получената хроматограма представлява колекция от цветни петна, разположени в определен ред по ивица хартия.

Фигура: 22. А - възходяща хроматограма; B - низходяща хроматограма; 1 - съд за хроматография; 2 - резервоар за разтворител; 3 - хроматографска хартия; 4 - начални точки; 5 - отделени компоненти; 6 - разтворител отпред.

При низходяща хроматография разтворителят се движи по хартията от резервоара за разтворител в горната част на съда. По този начин отделните компоненти могат да бъдат елуирани. Най-често срещаните разтворителни системи: СН3СООН-Н2O (15:85 обем), 1-бутанол - СН3СООН-Н20 (4: 1: 5), 2-пропанол - NH3 (конц.) - Н2O (9: 1: 2), 1-бутанол - 1,5 N. NH3 (1: 1), фенол - вода и др. Съставът на подвижната фаза обикновено се избира експериментално или въз основа на данните, дадени в справочници или монографии върху хартиена хроматография.

Седиментна хроматография - хроматографски метод, основан на способността на веществата да се отделят, за да образуват слабо разтворими съединения с различни продукти на разтворимост. Стационарната фаза е инертен носител, покрит със слой утаител; разделяните вещества, които са в подвижната фаза, взаимодействат с утаителя и образуват слабо разтворими вещества - утайки. При по-нататъшно преминаване на разтворителя се случват едно по едно: разтварянето на тези утайки, пренасянето на веществото през слоя на неподвижната фаза, утаяването отново и т.н. В този случай скоростта на движение на утайката през стационарната фаза е пропорционална на нейния продукт на разтворимост (PR). В този случай хроматограмата ще бъде разпределението на валежите върху носещия слой. Пример е разделянето на халогенидни йони върху носител (силикагел, целулоза и др.), Импрегниран със сребърна сол. Може да се използва за отделяне на утайките при тяхната неравномерна разтворимост в различни разтворители или в разтвори с различна йонна сила. Прилага се както в колонен, така и в плосък вариант.

Гел филтрация или хроматография за изключване на размера (сито, проникване на гел, хроматография с гел филтрация) - вид хроматография, по време на която молекулите на веществата се разделят по размер поради различната им способност да проникват през порите на неподвижната фаза. В този случай първите, които напускат колоната, са най-големите молекули (с по-високо молекулно тегло), способни да проникнат в минималния брой пори на неподвижната фаза. Последните са вещества с малки молекулни размери, които свободно проникват в порите. За разлика от адсорбционната хроматография, при гел филтрацията неподвижната фаза остава химически инертна и не взаимодейства с веществата, които трябва да се отделят. Към колоната се добавя пробен разтвор, чийто обем е ограничен за качеството на хроматографията. За аналитичното разделяне то не трябва да надвишава 0,1% от CV (общ обем на колоната), а за препаративно пречистване не трябва да надвишава 8-10% от CV. Колоната е пълна с прах, частици или гранули от които имат пори с определен диаметър. Високомолекулните вещества, които не навлизат в порите, преминават между гранулите, така че техният задържащ обем е равен на обема на колоната минус обема на стационарната фаза (т.нар. Свободен обем). Те първо се елуират. Молекулите със среден размер се поставят в порите на сорбента, но не напълно. Следователно техният задържащ обем е малко по-висок от свободния обем. Те елюират втори. Най-малките молекули свободно влизат в порите заедно с молекулите на разтворителя. Следователно техният задържащ обем в колоната е много по-висок от техния свободен обем и се доближава до общия обем на колоната (т.е. 100% CV). Те се елуират последни.

Качествен химичен анализ. Класификация на методите за качествен анализ (фракционен и систематичен, макро-, полумикро-, микро-, ултрамикроанализ). Аналитични реакции и реактиви, използвани при качествен анализ (специфични, селективни, групови). Използване на качествен анализ във фармацията.

Качествен анализ - идентификация (откриване) на компонентите на анализираните вещества и приблизителна оценка на количеството на тяхното съдържание в вещества и материали. Компонентите могат да бъдат атоми и йони, изотопи на елементи и отделни нуклиди, молекули, функционални групи и радикали, фази и др.

Класификация на методитеМетодът за анализ се избира в зависимост от очакваното съдържание на веществото и от границата на откриване на приложената реакция. В момента полумикроанализът се използва при изучаване на качествен химичен анализ в образователни лаборатории. .