Ролята на биохимичните методи в съвременната лабораторна диагностика

Учени в описанието на методи за биохимична диагностика

Основите на титриметричния метод са поставени още в средата на 18 век. През 1726г. C. J. Geoffroy неутрализирани киселини за аналитични цели.

Към 1750 г. разтвор с известна концентрация започва да се използва като титрант, а виолетовият екстракт служи като индикатор. През 1795 г. е предложен метод за определяне на хипохлорит.

J.L.Gay-Lussac по-късно предложи индиго като индикатор за редокс титруване. Той също така въведе термина "титруване".

Класически методи на имунохимичен анализ, описани в края на 19 век в трудовете на такива изключителни учени като Ehrlich, Bordet, Landsteiner.

През 1809г Полет и Страхов откри явленията електрофореза и електроосмоза.

Електрофореза със скорбялен гел, предложена от O. Смитис.

Предлага се полиакриламидна гел електрофореза (PAGE) Л. Орнщайн и D. Дейвис.

Феноменът на оптичната активност е известен от началото на 19 век. Това беше от откриването на оптичната активност (J. Bio, 1815) стереохимията започна да се развива. Основният принос за нейното изследване е от френски учени D. Arago, J. Bio, L. Pasteur, E. Cotton, O. Fresnel.

Практическите опити за количествено определяне на мътността датират от 1900 г., когато Уип и Джаксън разработи стандартна суспензия, съдържаща 100 ppm kieselguhr (диатомитна пръст) в дестилирана вода. Разреждането на тази суспензия дава възможност да се създаде така наречената "силициева" скала на лунатизъм въз основа на редица стандартни суспензии за калибриране на турбидиметри от онова време. Джаксън използва везната за работа с съществуващото тогава устройство с диафанометър и създаде това, което е известно като "турбидиметър на Джексън".

Хроматографският метод за анализ е приложен за първи път от руски ботаник Михаил Семенович Цвет през 1900г. Той използва колона, пълна с калциев карбонат, за да отдели растителните пигменти.

През 1952г J. Martin и R. Sinj е удостоен с Нобелова награда за химия за разработване на метод на разделна хроматография.

Спектрофотометрични методи при определяне на BZhU

Спектрофотометричен метод анализ - базиран на поглъщането на монохроматично лъчение, т.е.излъчване с една дължина на вълната във видимите и UV области на спектъра.

Спектрофотометричен метод за определяне на урея

Уреазен метод.Ензимните методи се основават на хидролиза на урея чрез уреаза в инкубационна среда за въглероден диоксид и амоняк. Образуваният амоняк може да се определи чрез силно чувствителна и специфична реакция с фенол хипохлорит и катализатор нитропрусид, чрез реакция салицилат-хипохлорит, реакция с реагент на Неслер (той е 10 пъти по-малко чувствителен в сравнение с фенол хипохлорит, ниско специфичен) чрез дихлороизоциануратна реакция (наличие на протеин).

Спектрофотометричен метод за определяне на PVC

Ензимен метод.Пировиновата киселина под въздействието на лактат дехидрогеназа (LDH) се редуцира до млечна киселина. В този случай се получава окисляването на редуциран никотинамид десдинуклеотид (NAD • I "): по изменението на оптичната плътност на реакционната смес може да се прецени концентрацията на пировиноградна киселина.

Спектрофотометричен метод за определяне на протеини, съдържащи въглехидрати

Гликозилиран хемоглобин.Фруктозата, която е част от стабилната форма на гликозилиран хемоглобин, се дехидратира от фосфорната киселина, образувайки 5-хидроксиметилфурфурол, който реагира с тиобарбитуровата киселина, образувайки оцветен комплекс с максимална абсорбция при 443 nm

По механизма на взаимодействие

  • Разпределение; Йонен обмен; Адсорбция; Изключителен; Affine; Утаечни

По целта на

  • Аналитичен; Полупрепаративен; Препаративен; Индустриална

Липидите и мастните киселини се определят по метода тънкослойна хроматография: За хроматография на висши мастни киселини и техните производни се използва насипен слой от силикагел и алуминий, както и слой от силикагел-гипс. Колонната хроматография се използва за препаративно разделяне.

Газо-течна хроматография: За анализа се използват не самите мастни киселини, а техните производни - метилови естери.

Протеините и въглехидратите по този метод се определят рядко.

Ролята на биохимичните методи в съвременната лабораторна диагностика

Често външните прояви на много напълно различни заболявания са много сходни и само поредица от лабораторни изследвания могат да установят точна диагноза. Също така помага при избора на най-ефективното лечение. На този етап трябва да сравните лабораторните стойности преди, по време и след лечението. Наред с по-модерните области като ELISA диагностика и PCR диагностика, не трябва да се забравя и за общоклиничните и биохимичните изследвания. Въпреки факта, че тези техники са разработени през миналия век, благодарение на модерното оборудване, те позволяват за много кратко време да се оцени състоянието на пациента.

Биохимични показатели на кръвта. За да се получи пълна картина на работата на един или друг орган на човешкото тяло, методът на биохимичен анализ на кръвта се използва успешно повече от десетилетие. Това е един от методите на лабораторна диагностика, който е много информативен за лекаря и има висока степен на надеждност. Биохимичният кръвен тест не само ще разкрие пълната картина на функционирането на определен орган, но също така ще покаже дали човек има дефицит на определен микроелемент или витамин. Всяка промяна в химичния състав на кръвта показва неблагоприятна ситуация и необходимостта от спешна намеса. В съвременната лабораторна диагностика биохимичните анализатори играят огромна роля за определяне на биохимичните параметри, които позволяват най-точното определяне на биохимичните параметри на кръвта.

Известни са огромен брой биохимични параметри на кръвта, отразяващи работата на липидния, въглехидратния и протеиновия метаболизъм. Нека се спрем на най-използваните от тях.

Показатели за въглехидратния метаболизъм. Измерването на кръвната глюкоза е основният лабораторен тест за диагностика на диабет. Изследването се извършва на гладно, не по-малко от 8 часа (!) След последното хранене. Необходимо е да се изключи повишен психо-емоционален и физически стрес. При някои пациенти някои признаци предполагат начална или латентна форма на нарушение на въглехидратния метаболизъм. В тези случаи тест за толерантност към глюкоза с глюкоза на гладно и след прием на определено количество глюкоза помага да се разкрият скрити нарушения на метаболизма на въглехидратите. Ендокринолог назначава и наблюдава изследването.

Липиден метаболизъм. В регулирането на липидния метаболизъм играе съществена роля централната нервна система, както и много ендокринни жлези (генитални, щитовидна, хипофизна, надбъбречни жлези). В съвременна лаборатория се определя концентрацията на следните кръвни липопротеини:

1. Общ холестерол

2. Липопротеини с висока плътност (HDL),

3. Липопротеин с ниска плътност (LDL).

4. Триглицериди (TG)

Протеинов метаболизъм. Най-важният показател за метаболизма на протеините е общият кръвен протеин. Плазмените протеини имат много функции в тялото, а нивата на протеини са един от най-важните лабораторни показатели. Концентрацията на общия протеин в серума зависи главно от синтеза и разграждането на две основни протеинови фракции - албумин и глобулини. Общите нива на протеини могат да бъдат повлияни от положението на тялото и физическата активност. Основният краен продукт на белтъчния метаболизъм е уреята. Нивото му в кръвта се дължи на съотношението на процесите на образуване и отделяне. При клиничната диагноза определянето на урея в кръвта обикновено се използва за оценка на екскреторната функция на бъбреците.

Както можете да видите, всички кръвни показатели (общоклинични, биохимични) са тясно свързани помежду си. Следователно е погрешно да се оценява състоянието на тялото по един показател. Изследванията трябва да се извършват в комплекс, за да се получи най-точната картина на нарушенията и да се приложи адекватно лечение.