Основни характеристики на gh, gzhh и vezhh

Разтваря се във подвижната фаза

Основните компоненти на инструментите за хроматография са: устройство за въвеждане на проба, устройство за подаване на елуент (газ или течност), хроматографска колона, детектор, устройство за записване и обработка на резултатите от анализа.

Анализираната проба се инжектира или с микро спринцовка, или с помощта на специално устройство - дозатор.

Хроматографска колона е права, спирална или V-образна тръба, направена от стъкло или неръждаема стомана, с вътрешен диаметър от 0,6 до 5 mm, дължина от 1 до 2 m.

Като адсорбент (стационарна фаза) се използват материали на основата на силициев диоксид (хроматони, зеолити), флуоровъглеродни полимери (тефлон, полихром), полистирол и дивинилбензен (полисорби) и др. Размерът на частиците на сорбента е от 0,1 до 0,5 mm.

HPLC сорбентът се обработва с висококипяща течност, която образува тънък филм върху него, в слоя на който протича процесът на разпределение на аналитите, разтворени в потока на газ-носител, движещ се през колоната. Като такива носители се използват вазелин и силиконови масла, фталати (дибутил-, диоктил- и др.), DMF, полигликоли и др. В количество 1-20% от масата на сорбента.

Компонентите на анализираната смес, напускащи колоната в потока на носещия газ, влизат в детектора, който реагира на промяна във всяко физическо свойство на газовата смес, преминаваща през нея. Показанията се преобразуват в електрически сигнал и се предават на записващо устройство (инструмент), например на потенциометър лента.

Има няколко вида детектори, най-често използваният детектор е топлопроводимост (катарометър) и йонизация на плазмата.

Действие на детектора на топлопроводимост въз основа на измерване на топлопроводимостта на носещия газ в присъствието на други вещества.

Действие на плазмен йонизационен детектор въз основа на измерване на електрическата проводимост на пламъка на водородна горелка, когато газовата смес, напускаща колоната, преминава през нея.

Детекторът на изхода на колоната автоматично и непрекъснато определя броя на отделените съединения в подвижната фаза. Сигналът на детектора се записва от записващо устройство, извиква се получената диаграма хроматограма.

Хроматограма - това е крива, показваща зависимостта на концентрацията на аналитите в елуата от време на време.

Всяко вещество на хроматограмата образува крива, наречена връх.

Критерии за хроматографски процеси

Холдинг е основният критерий за хроматографския процес и се описва от уравнението:

Vr е задържащият обем на веществото или обемът на елуента, преминал през колоната по време на задържането на веществото;

Vo е мъртвият обем или задържащият обем на компонента, който не се отделя;

K - коефициент на разпределение;

Vs - обем на стационарната фаза.

Ефективност - критерий за оценка на хроматографска колона.

Ефективността се характеризира с броя на теоретичните плочи и височината, еквивалентна на теоретичната плоча.

Теоретична плоча (TT) е условна секция на хроматографската колона, в която се установява равновесието на веществото, разпределено между подвижната и неподвижната фази (една теоретична плоча съответства на единично разпределение между фазите).

Броят на теоретичните плочи (N) се изчислява по формулата:

Колкото по-висок е N в системата, толкова по-добро е хроматографското разделяне.

Височина, еквивалентна на теоретичната плоча (HETT) е реципрочната стойност на теоретичната плоча. Изчислено по формулата:

L е дължината на колоната;

Колкото повече N и по-ниска HETT, толкова по-ефективна е хроматографската система.

Селективност на колонаи е основният фактор за постигане на хроматографско разделяне.

Селективност (L) е съотношението на времето на задържане на 2 съседни компонента в сместа.

Селективността е свързана с разликата във взаимодействието с подвижната и стационарната фази. Мярката за селективност се определя с помощта на пикова резолюция.

Пикова резолюция Разстоянието между върховете на върховете, изразено в единици от ширината на върховете им.

Колкото по-високи са Rs, толкова по-добро е разделянето.

Разделителната способност на хроматографските пикове зависи от следните фактори:

- системна селективност (L);

-коефициент на разпределение (Кр);

Връзката между тези фактори се изразява чрез уравнението:

Трябва да се отбележи, че увеличаването на ефективността на хроматографската система чрез увеличаване на броя на TT (N) означава замяна на съществуващата колона с по-ефективна (по-дълга). Повишена селективност се постига чрез заместване на подвижната фаза или промяна на състава на елуента.

Качествен анализ на хроматограмите извършено по метода на относително задържане (обем или време) или с помощта на свидетелски вещества.

Време на задържане на веществото (tr) е времето, изминало от инжектирането на пробата до излизането на веществото от колоната.

Време на задържане на абсорбиращия компонент (tm) е времето на престой на неадсорбиращото се вещество в хроматографската колона.

tr 'е коригираното (намалено) време. Изчислено по уравнението: tr ’= tr - tm

Съвпадението на времената на задържане на двете вещества може да служи като доказателство за тяхната идентичност.

Метод на веществото от страничен наблюдател се състои в последователно получаване на хроматограмата на анализираната смес и веществата-свидетели, чието присъствие се предполага да бъде открито в нея. Времето на излизане на даден компонент от колоната при същите условия на разделяне винаги ще бъде постоянно и може да служи като качествена характеристика на дадено вещество.

Количествен анализ извършва се според параметрите на хроматографския пик - според неговите ■ площ или височина. Когато определяте площта на пика, умножете височината му по ширината, измерена на половината от височината на пика.

W0.5 - ширина на върха на половината височина.

Устройството е предварително калибрирано. Чрез въвеждане на точно известни количества от аналита и определяне на площта на пика, се нанася графика спрямо площта (или височината) спрямо количеството вещество.

з0,5

тr, Vr

Фигура: 2. Хроматографски връх и основните му параметри.

tm, Vm е времето на задържане или обемът на не абсорбиращия се компонент;

tr, Vr - време или обем на задържане на веществото;

h 0,5 - пикова полувисочина;

W е ширината на върха в основата;

W0.5 - ширина на върха на половината височина.

Калкулатор

Безплатна услуга за оценка

Попълнете заявлението. Експертите ще изчислят цената на вашата работа
Изчисляването на разходите ще бъде изпратено по пощата и чрез SMS

Номер на вашето заявление

Автоматично писмо за потвърждение с информация за приложението ще бъде изпратено на пощата точно сега.