Изолиране на апикални меристеми

В тъканната култура могат да се размножават растения и да се получи здравословен (без вируси) посадъчен материал. За лечение на растения се използва култура на върха или култура на апикални меристеми, тъй като вирусите проникват във върха на стъблото по-бавно, отколкото в други части на растенията. При отглеждането на върховете възпроизводството на вируси се потиска от реакцията на растителния организъм към травма, причинена от отрязването на върха.

In vitro използва върхове на апикални и странични пъпки (точки на растеж), коренови връхчета (особено разсад). Апикална меристема - група меристематични (образователни) клетки, организирани в растежен център, заемащи крайно положение в летораста или корена и осигуряващи формирането на всички органи и първични тъкани. Горната част на апикалната меристема е представена от инициали (единична клетка в хвощ и много папрати и многоклетъчна структура в семенните растения). Най-близките производни на първоначалните клетки често се изолират в зоната на протомеримата. Следват го тъкани, които вече са частично диференцирани, но все още са в меристематично състояние, които се означават като частично определена първична меристема. В зависимост от тъканните системи, които тя произвежда, детерминираната меристема включва следните клетъчни комплекси: туника, допълнително образуване на първичната покривна тъкан (епидермис) и част от първичната кора, и тяло, чиито клетки постепенно образуват комплекс от проводящи тъкани (централен цилиндър); по същество - дерматоген, диференциране в първичната покривна тъкан (ризодермис); periblem - бъдещата първична кора; плерома - централен цилиндър. По този начин бъдещият ход на развитие на меристематичните тъкани се определя частично от самото им поставяне в върха на летораста и корена.

Обикновено малка част от меристемата до 0,5 mm се засажда върху хранителни среди. Като цяло закономерността е следната: колкото по-малък е размерът на меристемата, толкова по-голяма е вероятността да се получат безвирусни растения. Неговото изолиране се извършва в ламинарна кутия, като се използват препарати под увеличаване на бинокулярния микроскоп.

Фигура: Апикална меристема в апикалната пъпка на издънката на Elodea (Elodea canadensis):

A - надлъжен разрез; B - конус на растежа (външен вид и разрез); В - клетка от първичната меристема; D - клетка от оформен лист (1 - конус на растеж, 2 - първичен туберкул, 3 - вторичен туберкул - туберкул на аксиларна пъпка, 4 - примордии - рудиментарни листа).

Снимка Апикална меристема лилейник

Фигура: Апикална меристема на върха на корена:

1 - калиптроген, 2 - дерматоген, 3 - перибелема, 4 - плерома, 5 - ред клетки, от които се образува стела, 6 - клетки, изхвърлени от капачка, 7 - колумела.

Култивирането на растения от апикални меристеми позволява получаването на безвирусен здрав посадъчен материал за почти всички земеделски култури. Най-напълно разработената технология за получаване на картофи без вируси. По този начин системата за първично производство на семена и рехабилитация на картофения посадъчен материал включва следните етапи: подготовка на клубени за изолиране на апикални меристеми, изолиране на апикални меристеми, регенериране на растения от меристеми, адаптиране на регенериращи растения в защитена почва, получаване на първия производство на безвирусен материал на открито, отглеждане на безвирусен посадъчен материал в основните звена на производството на семена, запазване на колекцията от сортове.

Апикалните и страничните бъбречни върхове се използват в тъканната култура. За да се изключи ефектът на метаболитите на клубените върху разсад и да се увеличи регенеративният капацитет на изходния материал, от средната част на клубена се изрязват очи с част от паренхима (1,5 х 1,5 см). Очите са покълнали върху пясък, предварително обработен със суха топлина. Етиолираните разсад се отглеждат на тъмно при температура 25 ± 2 ° C, влажност на въздуха 70-80%. Пясъкът се навлажнява два пъти на ден, след 7-10 дни, храненето се извършва с разтвор на Knop.

Средно са необходими 30-45 дни от засаждането на меристемата в сряда до образуването на разсад с 5-6 листа, в някои случаи от 2 до 8 месеца. Средата се обновява при изчерпване и разсадът периодично се трансплантира в нова среда при стерилни условия.