Фенотип на еритроцитния антиген и индекс на сенсибилизация при донори на кръвни съставки и пациенти в Астана

J.C. Буркитбаев, Р.Б. Меирбекова, Е.Н. Курган, Л.Л. Карп, R.Z. Магзумова

Изследователски и производствен център по трансфузиология, Астана, Казахстан

Трансфузиология №2, 2013

Обобщение

В резултат на проучването беше установено голямо разнообразие от фенотипове в системата резус, както и доста висока степен на сенсибилизация при реципиентите и висок индекс на сенсибилизация на населението на град Астана.

Ключови думи: антигенен състав на еритроцитите.

Въведение

Изследването на разпространението на основните клинично значими антигени на еритроцитите при донори, определяне на алоимунизационния индекс е необходимо условие за адекватна профилактика на реакции след трансфузия и усложнения от хемолитичен тип. Определянето на кръвната група, Rh-принадлежността и типизирането на еритроцитните антигени са от голямо значение при извършване на кръвопреливане за селекция на съвместими двойки донор-реципиент и предотвратяване на най-животозастрашаващите реципиенти на хемолитични усложнения след трансфузия [1- 16]. Техниката на гел аглутинация е разработена, за да стандартизира реакциите на хемаглутинация и да получи надеждни резултати. Тестването за индивидуална съвместимост на кръвта на донора и реципиента за еритроцитни антигени не замества задължителното имунохематологично изследване, а само го допълва. Използването на гел системата може също да намали риска от инфекция на персонала, дори когато се работи с потенциално инфекциозни проби [2]. Поради високата чувствителност, стандартизация и добра възпроизводимост на резултатите, методите на аглутинация в гела се използват широко [3].

Целта и задачите на изследването

Целта на работата беше да се изследва честотата на поява на еритроцитни антигени и да се определи нивото на сенсибилизация на населението на Астана.

Материали и методи за изследване

Материалът за изследване е 119882 кръвни проби от донори и 6313 реципиенти за периода 2010–2012 г. Възрастта на донорите варира от 18 до 60 години. Средната възраст на донорите е била 43,4 ± 5,1 години. Възрастта на пациентите варира от 0 до 77 години. Средната възраст на пациентите е 37,9 ± 9,5 години. Сред донорите имаше 64 736 мъже (54,0%) и 55 146 жени (46,0%). Сред получателите мъжете са 66,9%, жените - 33,1%. Контингентът на изследваните пациенти: реципиенти с анамнеза за множество трансфузии; бременни жени, които са били изложени на риск от алоимунизация; деца с хемолитична болест на новороденото. Всички кръвни проби от донори бяха тествани за групова принадлежност, използвайки системата ABO чрез кръстосан метод, използвайки моноклонални антитела, стандартни еритроцити, както и чрез микроколонна аглутинация, използвайки касети ORTHO BioVue. Кръвни проби от реципиенти бяха изследвани за групова принадлежност, използвайки системата ABO, използвайки техниката на гела Scangel. Антиген D от системата на Pesus беше открит с помощта на Tsoliklon AntiD Super (OOO Hematolog, Москва) и с помощта на метода на микроколонна аглутинация, използвайки ORTHO BioVue касети; освен това, всички RH (D) -негативни донори (3464 от 119 000) присъствието на варианти и слаби форми на антиген D, използвайки анти-RH1 (D)/RhW1 моноклонални антитела в реакцията на Coombs, използвайки техниката на Scangel гел (Scangel Coombs анти-IgG карти, C3d), BioRad Laboratories, САЩ). Всички кръвни проби от донори бяха тествани за наличие на антиген на Kell, използвайки анти-К Супер моноклонални антитела (Hematolog LLC, Москва) и микроколонна аглутинация, използвайки ORTHO BioVue anti-K. Всички RH (D) -негативни донори, както и "персонал" RH (D) -положителни донори бяха фенотипирани за C, C, E, e резус антигени, използвайки метода на микроколона аглутинация, използвайки RH/K ORTHO BioVue касети, всички получатели бяха фенотипизиран за C, c, E, e антигени на резус системата, използвайки гел метода, използвайки Scangel Monoclonal RH/Kell карти, произведени от Bio-Rad Laboratories, САЩ. Във всички кръвни проби на донори и реципиенти антиеритроцитни алоантитела са скринирани с помощта на реакцията на Coombs, извършена с помощта на гел техниката на Scangel (Scangel Coombs anti-IgG карти, C3d), с Scangel I-II-III еритроцити, произведени от Bio- Rad Laboratories, САЩ-Франция). В случай на положителни скринингови резултати, антителата са идентифицирани с еритроцити ScanPanel от 10 клетъчни линии, лаборатории Bio-Rad, САЩ.

Резултати и дискусия

Анализирахме разпределението на кръвните групи от системата ABO при донори и реципиенти (таблица 1).

Получените данни показват, че разпределението на кръвните групи според системата ABO при донори и пациенти е сходно. Преобладават кръвните групи О и А. Разкритата от нас честота на поява на А2 антигена в кръвни групи А и АВ е 0,32% за донори и 3,2% за пациенти. Съотношението на Rh (D) -положителните и Rh (D) -отрицателните лица, идентифицирани от нас сред пациентите, беше съответно 94,39 и 5,6%. За донорите това съотношение е 92,43% Rh (D) -положително и 7,57% Rh (D) -отрицателно (Таблица 2).

Нашите данни разкриват значително по-висок процент на D вариант антиген при пациенти. Това може да е резултат от отслабването на D антигена при заболяване. Изследването на антигенния състав на еритроцитите на кадрови донори и пациенти показа, че най-често срещаният фенотип сред Rh (D) позитивните индивиди е CCDee- фенотипът, последван от CcDee-, CcDEe- и ccDEe- фенотипите (Таблица 3).

Най-голямата опасност в трансфузионната връзка са хомозиготните комбинации от антигени на Rh системата (CC, cc, EE и нея), които се намират в 86% от Rh-положителните (D +). Всички донори и реципиенти, независимо от групата и Rh, бяха предварително скринирани за наличие на анти-еритроцитни антитела. При оценка на антитела срещу еритроцитите, имунни антитела с различна специфичност са открити при 13,3% от пациентите. Поради факта, че сред контингента от лица, изследвани в лабораторията, преобладават бременни жени, които са били изложени на риск от алоимунизация, както и пациенти, получили множество трансфузии, индексът на сенсибилизация при пациентите е висок. Антителата към антигените на резус еритроцитната система се появяват в организма в резултат на преливане на донорски еритроцити, съдържащи антигени, които липсват в реципиента, както и когато майката е имунизирана с фетални еритроцити. Честотата на поява на алоантитела към антигени на еритроцитите от резус-системата е различна и се определя от имуногенността на антигена и честотата на поява в популацията. В 31% от случаите антитела не са идентифицирани, което е свързано с комбинираната специфичност на антителата или наличието на антитела към антигени, широко разпространени в популацията. При изследване на честотата на алосенсибилизация сред RH (D) -положителни и RH (D) -отрицателни индивиди, беше установено, че RH (D) -отрицателните хора се имунизират 2–2,5 пъти по-често от RH (D) -положителните хора. Антителата срещу незначителни еритроцитни антигени са по-чести при Rh-позитивни индивиди, отколкото при Rh-отрицателни индивиди. При донорите честотата на алоантителата е 0,46% (Таблица 4).

Проблемът с хемолитичната болест на новородените (HDN) е спешен за град Астана. Най-често HDN се развива в резултат на конфликт между антигените на резус-системата и AB0 (Таблица 5).